医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法
国标（GB）简介：
“GB”代表中国国家标准，其中“G”和“B”分别取自“国标”二字的汉语拼音首字母。国家标准分为两类：强制标准（GB）和推荐标准（GB/T）。推荐标准带有“/T”，其中“T”代表“推荐”的汉语拼音首字母。
了解GB/T16294-2010：
GB/T16294-2010是针对医药工业洁净室及洁净区的沉降菌测试和环境验证的标准。尽管它是特定于洁净区的，但也可用于评估任何环境中的污染程度。
一、GB/T16294-2010解读
1. 适用范围
本标准适用于医药工业洁净室和洁净区的沉降菌测试。实际上，它可以用于任何需要评估洁净度的环境。
2. 基本概念
- 沉降菌：指通过自然沉降到培养皿中的活微生物粒子。
- 沉降菌菌落数：通过计算每个培养皿中的菌落数来评估洁净度。
3. 测试方法
- 通过让空气中的微生物自然沉降到培养皿中，然后在恒温培养箱中培养，直到可以肉眼观察到菌落。
- 需要专业人员执行，但具备相关知识和技能的人也可以进行。
4. 测试准备
- 所用物品必须提前严格消毒。
- 需要设立空白对照组以确保准确性。
5. 培养基选择
- 可以选择大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）或沙氏培养基（SDA），或营养琼脂培养基。
- 可以使用90mm×15mm高硼硅酸玻璃培养皿或一次性培养皿。
6. 测试点布置
- 平板放置位置应参照GB16292-2010，并考虑关键设备和活动范围。
- 平板应放置在气流相对稳定的区域，采样点高度一般在0.8m至1.5m之间。
7. 菌落计数
- 按照每个培养皿中的菌落数进行计数。
- 若空白对照污染，试验结果无效，需重新测试。
二、洁净室沉降菌的详细测试方法
1. 制备固体培养基
- 参照“微生物菜谱-培养基”相关内容进行制备。
2. 布置固体平板位置
- 参照GB16292-2010进行平板位置布置，并确保培养皿数量符合要求。
3. 沉降采样
- 在布置好的位置放置至少两个平板（一个实验组，一个空白对照），并标记。
- 打开实验组平板盖进行采样，对照组保持封闭。
- 微生物沉降一定时间后，合上实验组平板盖。
4. 培养
- 将实验组和对照组平板放置于恒温恒湿培养箱中倒置培养。
5. 计数统计
- 培养结束后，直接观察并计数菌落。
6. 评估洁净室洁净度
- 洁净室的等级数字越小，表示洁净度越高，污染程度越低。
三、操作技巧和注意事项
1. 所有仪器和试剂必须严格灭菌，以保证测试的可靠性。
2. 可以提前两天制作固体平板，并进行空培养两天，以防止平板污染。
3. 测试前检查每个培养皿的质量，剔除变质、破损或污染的皿。
4. 采样时尽量减少人员流动。
5. 每个采样点至少放置三个平皿，并设立空白对照组。
6. 计数时要仔细辨别所有菌落，包括重叠的菌落。
7. 试验过程中，记录温度、湿度、人员流动、培养及成分等信息。
8. 若空白对照污染，试验结果无效，需重新测试。
文稿来源：全国标准信息服务平台